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肽段覆盖率检测服务
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肽段覆盖率检测服务是蛋白质鉴定与质量控制的关键技术,通过胰蛋白酶等特异性蛋白酶将目标蛋白酶解为肽段,利用高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术检测肽段,结合数据库检索匹配,计算匹配肽段占目标蛋白总序列的比例(即肽段覆盖率)。该技术可直观反映蛋白测序的完整性、是否存在降解或截短,同时辅助验证蛋白纯度与表达正确性,广泛应用于重组蛋白质控、抗体鉴定、天然蛋白结构研究等场景,为后续蛋白功能实验、结构解析提供重要依据。
技术应用
应用场景 | 常用标记物 | 技术优势 |
重组蛋白质量控制 | 重组酶、融合蛋白、治疗性蛋白 | 快速评估蛋白完整性与降解情况 |
抗体纯度与完整性验证 | 单克隆抗体、抗体片段 | 辅助验证抗体是否存在降解或修饰 |
蛋白结构解析前评估 | 目标结构蛋白、膜蛋白 | 确保蛋白纯度与完整性,满足结构解析需求 |
蛋白表达体系优化 | 原核/真核表达产物 | 验证不同表达条件下蛋白的完整性差异 |
天然蛋白分离鉴定 | 纯化天然蛋白、蛋白复合物 | 辅助确认目标蛋白,排除杂蛋白干扰 |
服务流程
样品接收与质控→蛋白定量与变性→酶解反应(胰蛋白酶/特异性蛋白酶)→肽段脱盐纯化→LC-MS/MS检测→数据库检索与肽段匹配→覆盖率计算与分析→报告生成→成果交付
样本要求:
服务编号 | 服务名称 | 样本类型 | 样本要求 | 实验周期 |
BIOFW033 | 肽段覆盖率检测服务 | 纯化蛋白/重组蛋白 | 纯度>80%,浓度≥1mg/mL,样本总量≥20μg;避免含高浓度去污剂、盐类,建议以冻干粉或低盐缓冲液溶解;需提供蛋白序列信息(GenBank登录号或完整序列) | 常规3-5周(收到样品后) |
抗体及片段 | 纯度>85%,浓度≥1mg/mL,样本总量≥20μg;提供抗体轻链/重链序列(如有) | |||
蛋白复合物 | 明确复合物组成及各亚基序列信息,样本总量≥50μg,纯度>75% |
优势类别 | 具体说明 |
检测精准性 | 采用高分辨率质谱仪与专业检索软件(Mascot、SEQUEST),确保肽段匹配准确性,覆盖率计算误差<5% |
酶解高效性 | 优化酶解体系(温度、pH、酶比),针对不同蛋白特性调整方案,提高酶解效率与肽段覆盖率 |
应用适配性 | 适配纯化蛋白、抗体、蛋白复合物等多种样本,满足科研与质控多场景需求 |
结果直观性 | 提供肽段匹配图谱与覆盖率示意图,直观展示蛋白测序完整性与降解情况 |
全方位支持 | 前期提供蛋白样品制备与酶解方案咨询,后期提供覆盖率结果解读与技术建议 |

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