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离子交换层析
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离子交换层析服务，指利用蛋白质表面带电基团与介质上可交换离子之间的可逆静电吸附差异进行分离的中低压层析技术。其核心是通过调控缓冲液的pH值（改变蛋白净电荷）或盐浓度（竞争性置换），实现目标蛋白与杂质的高效分离。该技术因载量高、分辨率优异、条件温和且成本可控，已成为生物大分子纯化工艺中应用最广泛的“主力”层析手段，覆盖从早期捕获到精细纯化的全流程。
技术应用：
应用领域 | 具体说明 |
抗体药物捕获与精纯 | 作为Protein A亲和层析后的关键精纯步骤，有效去除宿主细胞蛋白、脱落的Protein A配体、聚集体及DNA；或用于非亲和标签抗体的直接捕获。 |
重组蛋白与酶纯化 | 基于目标蛋白与杂质的等电点差异，在特定pH下使其分别结合或流穿，一步实现高纯度、高浓缩倍数的分离，适用于带His标签、无标签及天然蛋白。 |
核酸与病毒载体纯化 | 利用DNA/RNA的强负电骨架，在阴离子交换介质上高效结合，去除宿主核酸、空壳病毒及内毒素，用于质粒DNA、mRNA及AAV/LV病毒载体的工艺开发。 |
多肽与电荷异构体分析 | 高分辨率盐梯度或pH梯度洗脱，可区分仅相差一个电荷的异构体（如脱酰胺、C端赖氨酸截短），用于工艺优化与质量控制。 |
服务详情：
样品与柱子准备--样品加载与结合--洗涤/洗脱--纯化后处理
服务流程：
样本要求：
服务编号 | 服务名称 | 样本类型 | 样本要求 |
BIOJJ0218 | 离子交换层析 | 蛋白/多肽样品 | 样品需澄清、0.22 μm过滤。上样前必须通过透析/脱盐置换至低盐缓冲液（通常电导率<5 mS/cm），并使pH与目标蛋白等电点保持适当差异（结合模式：pH低于pI 0.5–1.0（阳离子）或高于pI 0.5–1.0（阴离子））。 |
核酸样品 | 需溶于低盐、无核酸酶的TE或磷酸缓冲液中。建议上样前加热复性（如质粒）或冰上保持单链状态（如mRNA），以获得尖锐峰形。 | ||
高盐/高pH样本 | 必须经过脱盐或稀释至平衡缓冲液条件后方可上样，否则会导致完全不结合或流穿。 | ||
膜蛋白/脂溶性样品 | 需在缓冲液中添加低浓度非离子型去垢剂（如0.1% Triton X-100或DDM），并选用兼容去垢剂的离子交换介质。 |
优势类别 | 具体说明 |
全矩阵筛选与介质库 | 提供涵盖强/弱阳离子、强/弱阴离子及高载量/高分辨率/耐盐等不同特性的全系列商品化介质（如Sepharose、Capto、POROS系列），快速匹配最佳填料。 |
pH-电导率双维度优化 | 利用高通量预筛选平台（96孔滤板），在3–5个pH值、4–6个盐浓度组合下快速定位结合/洗脱窗口，3个工作日内输出最优条件。 |
工艺放大与法规支持 | 提供线性放大验证、清洁验证、填料寿命研究及完整CMC申报资料包，支持从实验室到GMP生产的无缝转移。 |
复杂样品处理专长 | 针对高黏度、含颗粒、脂蛋白或易沉淀样品，开发流穿模式、宽孔径介质或添加剂保护等定制化解决方案。 |
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